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    凝膠成像儀“切膠”時要注意什么?

    點擊次數:616 發布時間:2021-08-21
       凝膠成像儀的凝膠成像系統靈敏度越來越高,自動化程度也更高,設計也更加人性化,逐漸變得像傻瓜照相機一般易用。另外,外型也更加小巧、時尚。凝膠成像系統的基本骨架是CCD照相機、暗室和分析軟件。不過其功能不僅僅限于對瓊脂糖凝膠進行成像,現在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應用。
      凝膠成像儀切膠操作時的注意事項如下:
      1.電泳的buffer和gel都是新制的,切膠的臺子清理干凈,刀片需要洗凈,總之一句話就是保證切下的帶沒有外源DNA污染。
      2.切膠是要把整個目的片斷所在位置的膠全部回收。為了減少膠的體積,可以用相對比較薄的膠來做,只要夠點樣即可,也可采用薄而寬的梳子來跑膠。
      3.關于防護,在一般有機玻璃后就足夠了,戴上防護面具以保護眼睛,如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者對于膠有特殊要求,例如要求不含EB,可以采用點marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來確定目的條帶在膠上的位置進行切膠。
      4.按照正常程序點marker跑膠,然后切下有marker的膠,EB染色,紫外燈下與帶刻度的尺子一起照相。由于要回收的帶與marker間的相對位置已知,根據尺子來衡量未染色膠上目的帶的位置即可。如果覺得很難判斷,可以直接在marker邊點少量的樣,這樣位置就容易確定了。
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